Celesta操作手册.docx

Celesta操作手册 一、构造 1.电源：在仪器的右侧当中 2.仪器的面板：在仪器前方面板的右下方有3个流速控制键（LO/MED/HIGH）及3个功能 控制键（RUN/STANDBY/PRIME）（下图4.1）.

a:流速控制：LO：样品流速12ul/min MED:样品流速35ul/min HIGH:样品流速60ul/min b：功能控制：RUN：绿色时表示样品开始输入，黄色表示仪器不正常 STANDBY：无样品或者预热时的位置，此时激光管的功率会下降，可延长其寿命 PRIME：自动冲洗进样针，一个反冲的过程，通常在进样针有堵塞现象的时候启用 c:销液桶与废液桶：位于仪器正面下方 3.样品的输入区在仪器的中部：上样针、样品支架（下图4.2）.

4.数据处理系统：FlowJo软件
PC:操作系统：Windows7 内存：512MBRAM及以上 MAC:操作系统：OSX10.3或更高版本 内存：512MBRAM及以上 8888 BDFACSCelesta 国电医运行博，原的数药 4 二、模板的建立：开电脑，打开软件BDFACSDivaSoftware等待机器联机，若软件中没 有你所需要的模板，则重新建立一个，具体的步骤入下： 1. 在Browser窗口下的Administrator下依次建立 NewFolder（改名为某课题组）
NewFolder（改为使用者姓名） NewExperiment（改为实验时间） NewSpecime NewTube（样品名称） 2.若检测的内容与以前的一样，则可以复制以前模板，然后更改日期 3.在工具栏中选择散点图工具，其横坐标FSC-A，纵坐标为SSC-A 4.在工具栏中点击所选的图形类型，拉动鼠标成图，根据荧光染料所需要的接收通道，更 改坐标轴的名称.

5.根据你的实验对照样品设定gate，在工具栏中选择gate的不同形状，将在图形中集中 得成团细胞选中.

如需设定Marker线，点击工具栏中的横线或者正方形椭圆等，在直方图中我 们使用横线作标记；散点图中选择十字或者其他正方形椭圆以及不规则图形作为标记.

6.模板建立好后，可以测定实验样品.

三、单色标记的样品
根据对照样品情况调整FSC，SSC的Voltage大小，把细胞调整到适当的位置； 调整荧光染料接收通道的Voltage大小，调整阴性细胞群主要集中于10的三次方以内.

2. 然后测定实验样品.

3. 待收集到相应的细胞数，仪器会自动停止记录.

如果细胞数不够预设的量，或是需 要中途停止收集，点击Stoprecord>>点击Save直接记录数据.

四、双色及多色标记的样品 1. 阴性对照，单阳性对照（用于调节补偿） 2. 首先测定阴性对照，将它每个通道的图形调节在10的三次方以内 3. 然后检测单阳性对照，在pensation工具栏内，寻找相关通道进行补偿调节 4. 检测多色标记的样品 五、导出数据 1.右键选择需导出的实验，选择Export>>FCSFile 2.FlowJo10.0以下的选择FCS2.0 FlowJo10.0以上的可选择FCS2.0或FCS3.0或FCS3.1>>OK 3.选择保存路径E：课题组>>save