Celesta操作手册.docx

Celesta操作手册.docx文档页数:4文档大小:163.4KB文档格式:docxCelesta操作手册 一、构造 1.电源:在仪器的右侧当中 2.仪器的面板:在仪器前方面板的右下方有3个流速控制键(LO/MED/HIGH)及3个功能 控制键(RUN/STANDBY/PRIME)(下图4.1). a:流速控制:LO:样品流速12u...

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Celesta操作手册 一、构造 1.电源:在仪器的右侧当中 2.仪器的面板:在仪器前方面板的右下方有3个流速控制键(LO/MED/HIGH)及3个功能 控制键(RUN/STANDBY/PRIME)(下图4.1).

a:流速控制:LO:样品流速12ul/min MED:样品流速35ul/min HIGH:样品流速60ul/min b:功能控制:RUN:绿色时表示样品开始输入,黄色表示仪器不正常 STANDBY:无样品或者预热时的位置,此时激光管的功率会下降,可延长其寿命 PRIME:自动冲洗进样针,一个反冲的过程,通常在进样针有堵塞现象的时候启用 c:销液桶与废液桶:位于仪器正面下方 3.样品的输入区在仪器的中部:上样针、样品支架(下图4.2).

4.数据处理系统:FlowJo软件
PC:操作系统:Windows7 内存:512MBRAM及以上 MAC:操作系统:OSX10.3或更高版本 内存:512MBRAM及以上 8888 BDFACSCelesta 国电医运行博,原的数药 4 二、模板的建立:开电脑,打开软件BDFACSDivaSoftware等待机器联机,若软件中没 有你所需要的模板,则重新建立一个,具体的步骤入下: 1. 在Browser窗口下的Administrator下依次建立 NewFolder(改名为某课题组)
NewFolder(改为使用者姓名) NewExperiment(改为实验时间) NewSpecime NewTube(样品名称) 2.若检测的内容与以前的一样,则可以复制以前模板,然后更改日期 3.在工具栏中选择散点图工具,其横坐标FSC-A,纵坐标为SSC-A 4.在工具栏中点击所选的图形类型,拉动鼠标成图,根据荧光染料所需要的接收通道,更 改坐标轴的名称.

5.根据你的实验对照样品设定gate,在工具栏中选择gate的不同形状,将在图形中集中 得成团细胞选中.

如需设定Marker线,点击工具栏中的横线或者正方形椭圆等,在直方图中我 们使用横线作标记;散点图中选择十字或者其他正方形椭圆以及不规则图形作为标记.

6.模板建立好后,可以测定实验样品.

三、单色标记的样品
根据对照样品情况调整FSC,SSC的Voltage大小,把细胞调整到适当的位置; 调整荧光染料接收通道的Voltage大小,调整阴性细胞群主要集中于10的三次方以内.

2. 然后测定实验样品.

3. 待收集到相应的细胞数,仪器会自动停止记录.

如果细胞数不够预设的量,或是需 要中途停止收集,点击Stoprecord>>点击Save直接记录数据.

四、双色及多色标记的样品 1. 阴性对照,单阳性对照(用于调节补偿) 2. 首先测定阴性对照,将它每个通道的图形调节在10的三次方以内 3. 然后检测单阳性对照,在pensation工具栏内,寻找相关通道进行补偿调节 4. 检测多色标记的样品 五、导出数据 1.右键选择需导出的实验,选择Export>>FCSFile 2.FlowJo10.0以下的选择FCS2.0 FlowJo10.0以上的可选择FCS2.0或FCS3.0或FCS3.1>>OK 3.选择保存路径E:课题组>>save

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